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Carbomix樹脂結(jié)構(gòu)示意圖 |
Carbomix系列色譜柱專為高效分離制備水溶性或部分水溶性的有機(jī)化合物而設(shè)計,可用于分離糖類、有機(jī)酸、多肽和細(xì)胞代謝物中的生物有機(jī)小分子。Carbomix系列固定相是在低交聯(lián)度(5%、8%和10%)的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)顆粒(5、10 μm)表面鍵合磺酸基團(tuán)(-SO3H),即為Carbomix H-NP填料;若在此填料上繼續(xù)絡(luò)合不同的離子則形成不同類型的填料。如絡(luò)合離子為鈣離子(Ca2+),則為Carbomix Ca-NP填料;如絡(luò)合離子為鉛離子(Pb2+),則為Carbomix Pb-NP填料;如絡(luò)合離子為鉀離子(K+),則為Carbomix K-NP填料;如絡(luò)合離子為鈉離子(Na+),則為Carbomix Na-NP填料。
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5和10 μm Carbomix填料電鏡圖 |
Carbomix色譜柱技術(shù)參數(shù)表
類型 |
Carbomix H |
Carbomix Ca |
Carbomix Pb |
Carbomix K |
Carbomix Na |
||
基質(zhì) |
PS/DVB |
PS/DVB |
PS/DVB |
PS/DVB |
PS/DVB |
||
粒徑 (μm) |
5, 10 |
5, 10 |
5, 10 |
5, 10 |
5, 10 |
||
交聯(lián)度 |
5%, 8% and 10% |
5%, 8% and 10% |
5%, 8% and 10% |
5%, 8% and 10% |
5%, 8% and 10% |
||
固定相 |
-SO3H |
-(SO3)2Ca |
-(SO3)2Pb |
-SO3K |
-SO3Na |
||
pH穩(wěn)定性 |
1 – 3 |
5 – 9 |
5 – 9 |
5 – 9 |
5 – 9 |
||
最大耐壓 |
10% 交聯(lián)度 |
10 μm |
1,500 |
1,500 |
1,500 |
1,500 |
1,500 |
5 μm |
1,000 |
1,000 |
1,000 |
1,000 |
1,000 |
||
8% 交聯(lián)度 |
10 μm |
1,000 |
1,000 |
1,000 |
1,000 |
1,000 |
|
5 μm |
800 |
800 |
800 |
800 |
800 |
||
5% 交聯(lián)度 |
10 μm |
600 |
600 |
600 |
600 |
600 |
|
5 μm |
400 |
400 |
400 |
400 |
400 |
||
推薦流動相 |
2.5 mM H2SO4 |
H2O |
H2O |
H2O |
H2O |
||
推薦流速 |
7.8x300 mm柱 |
0.4-0.8 |
0.4-0.8 |
0.4-0.8 |
0.4-0.8 |
0.4-0.8 |
|
4.6x300 mm柱 |
0.1-0.30 |
0.1-0.30 |
0.1-0.30 |
0.1-0.30 |
0.1-0.30 |
||
最高耐受溫度 (oC) |
85 |
85 |
85 |
85 |
85 |
(1) 對于7.8x300 mm柱在最高溫度下而言,并扣除儀器的背壓。
(2) 對于固定相為5 μm的5%交聯(lián)度樹脂、規(guī)格為7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min。
● 均勻一致的粒徑確保了高分辨率和分離的高效性 |
均一的粒徑
Carbomix 固定相粒徑分布極窄,5 μm為5.0±0.2 μm,10 μm為10.0 ± 0.2 μm。如此均一的粒徑分布確保了賽分產(chǎn)品具有高的分離效率和回收率。圖1表明,分離單糖試驗中,Carbomix Ca-NP5色譜柱比其他品牌產(chǎn)品具有更高的分離效率。
圖1. 相同分離條件下,在Carbomix Ca-NP5 (5 μm, 8%交聯(lián)度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同規(guī)格鈣柱上分離6種單糖效果對比。
|
流動相: H2O
|
不同離子態(tài)
Carbomix樹脂多種可選離子態(tài)使得賽分Carbomix系列柱可廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的優(yōu)質(zhì)分離。例如,樹膠醛糖、核糖醇、阿糖醇很難在H柱上分離,卻能在Ca柱上實現(xiàn)完美分離;木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一個重疊峰,而在Pb柱上則能夠依次單獨流出。
不同離子態(tài)的選擇
離子
|
應(yīng)用 |
H |
發(fā)酵產(chǎn)物、含有機(jī)酸的果汁、醇類和糖類 |
Ca |
含大量果糖的玉米糖漿中的糖類、尤其適用于單糖、二聚糖、三聚糖、四糖及糖醇的分離 |
Pb |
木制品中的戊糖和己糖 |
K |
蔗糖、蜜糖、玉米糖漿、甜菜糖及其他含有糖類植物產(chǎn)品(含有甜菜堿、三甲基氯化銨等兩性離子的) |
Na |
低聚糖,尤其在含有大量無機(jī)鈉離子的情況下,如蜂蜜。 |
低交聯(lián)度
Carbomix樹脂的低交聯(lián)度使其在流動相中可以適當(dāng)?shù)娜苊?,尤其在高溫條件下這是實現(xiàn)大多數(shù)分離任務(wù)的典型模式。這種溶脹可以優(yōu)化分離時的比表面積、滲透性、容量、選擇性,及改變離子強(qiáng)度。PS/DVB粒子的交聯(lián)度越低,樹脂結(jié)構(gòu)就越開放,從而使更大分子量的多聚糖也有良好滲透性。圖2表明,在5% Carbomix Ca-NP5柱上,聚己糖(G6)可以很好的從基質(zhì)中分離,并且還能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的兩個峰得到了分離;而在8% Carbomix Ca-NP5上不但沒有G7和G8的峰,連G6的峰都不太明顯。
圖2. 不同交聯(lián)度Carbomix Ca-NP5 (5 μm, 7.8 x 300 mm)柱上麥芽糊精和甘油的流出曲線
色譜柱: Carbomix Ca-NP5
|
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優(yōu)異的穩(wěn)定性
Carbomix HPLC柱優(yōu)良的制造工藝和先進(jìn)的填裝技術(shù)保證了其具有高的穩(wěn)定性。即使是在升高溫度的條件下,Carbomix樹脂也能在純水和其他水緩沖體系中保持穩(wěn)定。圖3表明,55℃下,6天內(nèi)連續(xù)沖洗578倍柱體積,酸的保留時間僅改變了1%。
圖3. Carbomix H-NP5 (5 μm, 8%交聯(lián)度)柱55℃下連續(xù)用5 mM H2SO4沖洗后分離有機(jī)酸色譜圖
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色譜柱: 4.6x 250 mm
|
穩(wěn)定的批間重現(xiàn)性
由于采用了可控的表面化學(xué)修飾技術(shù)并嚴(yán)格監(jiān)控聚合物樹脂的生產(chǎn)過程,Carbomix柱具有很高的批間重現(xiàn)性。圖4表明,不同批次間的保留時間誤差在0.3%以內(nèi)。
圖4. 三個不同批次Carbomix H-NP10 (10 μm, 8%交聯(lián)度)柱分離有機(jī)酸色譜圖
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色譜柱: 7.8x300 mm
|
多種分離機(jī)理共同作用
Carbomix樹脂表面的抗衡離子(H+,Ca2+,Pb2+,K+和Na+)能緩和分離過程。通常,分離的過程涉及兩種或兩種以上的機(jī)理同時作用,包括體積排阻、離子排斥、離子交換、配體交換、反相作用及正相作用。對多糖類樣品來說,體積排阻機(jī)理是主要的作用機(jī)理,如圖4中寡聚糖的分離。而分離單糖時的主要機(jī)理則主要是配位效應(yīng),例如Ca型柱中分離葡萄糖的α、β-異構(gòu)體。在實現(xiàn)蜂蜜樣品的分離過程中,首要的機(jī)理為離子排斥作用,該作用使得無機(jī)鈉離子通過孔隙被洗脫下來。而體積排阻和配體交換作用則依次作用于寡聚糖和單糖的分離。對于分離有機(jī)酸用的Carbomix H型樹脂來說,反相作用和離子排阻作用均為首要機(jī)理。疏水性和pKa同時影響樣品組成的保留時間。這一特性使得Carbomix H型樹脂非常適合于監(jiān)測發(fā)酵過程中成分的變化。
應(yīng)用圖譜
Carbomix H-NP
|
||||
產(chǎn)品名稱
|
粒度 |
交聯(lián)度 |
規(guī)格 |
訂貨號 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
5% |
4.6x50 mm |
261005-4605 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
5% |
4.6x300 mm |
261005-4630 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
5% |
7.8x50 mm |
261005-7805 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
5% |
7.8x100 mm |
261005-7810 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
5% |
7.8x300 mm |
261005-7830 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
5% |
10x300 mm |
261005-10030 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
8% |
4.6x50 mm |
261008-4605 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
8% |
4.6x300 mm |
261008-4630 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
8% |
7.8x50 mm |
261008-7805 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
8% |
7.8x100 mm |
261008-7810 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
8% |
7.8x300 mm |
261008-7830 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
8% |
10x300 mm |
261008-10030 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
10% |
4.6x50 mm |
261010-4605 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
10% |
4.6x300 mm |
261010-4630 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
10% |
7.8x50 mm |
261010-7805 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
10% |
7.8x100 mm |
261010-7810 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
10% |
7.8x300 mm |
261010-7830 |
Carbomix H-NP |
10 μm |
10% |
10x300 mm |
261010-10030 |
|
Carbomix Ca–NP
|
||||
產(chǎn)品名稱 |
粒度 |
交聯(lián)度 |
規(guī)格 |
訂貨號 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
5% |
4.6x50 mm |
251005-4605 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
5% |
4.6x300 mm |
251005-4630 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
5% |
7.8x50 mm |
251005-7805 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
5% |
7.8x100 mm |
251005-7810 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
5% |
7.8x300 mm |
251005-7830 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
5% |
10x300 mm |
251005-10030 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
8% |
4.6x50 mm |
251008-4605 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
8% |
4.6x300 mm |
251008-4630 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
8% |
7.8x50 mm |
251008-7805 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
8% |
7.8x100 mm |
251008-7810 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
8% |
7.8x300 mm |
251008-7830 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
8% |
10x300 mm |
251008-10030 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
10% |
4.6x50 mm |
251010-4605 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
10% |
4.6x300 mm |
251010-4630 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
10% |
7.8x50 mm |
251010-7805 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
10% |
7.8x100 mm |
251010-7810 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
10% |
7.8x300 mm |
251010-7830 |
Carbomix Ca-NP |
10 μm |
10% |
10x300 mm |
251010-10030 |
|
Carbomix Pb–NP
|
||||
產(chǎn)品名稱 |
粒度 |
交聯(lián)度 |
規(guī)格 |
訂貨號 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
5% |
4.6x50 mm |
241005-4605 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
5% |
4.6x300 mm |
241005-4630 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
5% |
7.8x50 mm |
241005-7805 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
5% |
7.8x100 mm |
241005-7810 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
5% |
7.8x300 mm |
241005-7830 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
5% |
10x300 mm |
241005-10030 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
8% |
4.6x50 mm |
241008-4605 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
8% |
4.6x300 mm |
241008-4630 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
8% |
7.8x50 mm |
241008-7805 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
8% |
7.8x100 mm |
241008-7810 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
8% |
7.8x300 mm |
241008-7830 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
8% |
10x300 mm |
241008-10030 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
10% |
4.6x50 mm |
241010-4605 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
10% |
4.6x300 mm |
241010-4630 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
10% |
7.8x50 mm |
241010-7805 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
10% |
7.8x100 mm |
241010-7810 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
10% |
7.8x300 mm |
241010-7830 |
Carbomix Pb-NP |
10 μm |
10% |
10x300 mm |
241010-10030 |
|
Carbomix K–NP
|
||||
產(chǎn)品名稱 |
粒度 |
交聯(lián)度 |
規(guī)格 |
訂貨號 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
5% |
4.6x50 mm |
231005-4605 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
5% |
4.6x300 mm |
231005-4630 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
5% |
7.8x50 mm |
231005-7805 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
5% |
7.8x100 mm |
231005-7810 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
5% |
7.8x300 mm |
231005-7830 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
5% |
10x300 mm |
231005-10030 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
8% |
4.6x50 mm |
231008-4605 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
8% |
4.6x300 mm |
231008-4630 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
8% |
7.8x50 mm |
231008-7805 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
8% |
7.8x100 mm |
231008-7810 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
8% |
7.8x300 mm |
231008-7830 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
8% |
10x300 mm |
231008-10030 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
10% |
4.6x50 mm |
231010-4605 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
10% |
4.6x300 mm |
231010-4630 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
10% |
7.8x50 mm |
231010-7805 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
10% |
7.8x100 mm |
231010-7810 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
10% |
7.8x300 mm |
231010-7830 |
Carbomix K-NP |
10 μm |
10% |
10x300 mm |
231010-10030 |
|
Carbomix Na –NP
|
||||
產(chǎn)品名稱 |
粒度 |
交聯(lián)度 |
規(guī)格 |
訂貨號 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
5% |
4.6x50 mm |
221005-4605 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
5% |
4.6x300 mm |
221005-4630 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
5% |
7.8x50 mm |
221005-7805 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
5% |
7.8x100 mm |
221005-7810 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
5% |
7.8x300 mm |
221005-7830 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
5% |
10x300 mm |
221005-10030 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
8% |
4.6x50 mm |
221008-4605 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
8% |
4.6x300 mm |
221008-4630 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
8% |
7.8x50 mm |
221008-7805 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
8% |
7.8x100 mm |
221008-7810 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
8% |
7.8x300 mm |
221008-7830 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
8% |
10x300 mm |
221008-10030 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
10% |
4.6x50 mm |
221010-4605 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
10% |
4.6x300 mm |
221010-4630 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
10% |
7.8x50 mm |
221010-7805 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
10% |
7.8x100 mm |
221010-7810 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
10% |
7.8x300 mm |
221010-7830 |
Carbomix Na-NP |
10 μm |
10% |
10x300 mm |
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